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试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L-1,16 ℃,220 r·min-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。 相似文献
4.
共同农业政策作为联系欧盟成员国农业的纽带,在经历2003年的改革后,虽然在价格补贴、农村发展等方面取得一定的成效,但仍然面临财政负担、食品安全、新成员国加入等来自内外部的挑战和压力.为应对这些挑战和压力,欧盟进行了降低政策价格、微调配额等一系列的最新改革. 相似文献
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研究国产烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性,为其新兽药注册和临床合理应用提供依据。通过发情间隔、发情率、发情集中度、妊娠率等指标评价烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床效果;通过比较给药前后的临床体征、血常规指标、血清生化指标及组织病理学变化,评价烯丙孕素内服溶液对靶动物母猪的安全性。实验性临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液高(25 mg·d-1)、中(20 mg·d-1)、低(10 mg·d-1)剂量组以及空白对照组的母猪从停药到出现发情反应的间隔时间分别为(3.45±0.81)(3.35±0.66)(5.21±2.65)和(11.71±5.39)d,发情率分别为100%(20/20)、100%(20/20)、95%(19/20)、70%(7/10)。扩大临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液组和进口药物对照组的母猪在药物调控下均表现出良好的同期发情效果,发情间隔分别为(3.59±1.07)d和(3.75±1.22)d,发情率分别为96.72%(59/61)和98.33%(59/60)。靶动物安全性试验中,国产烯丙孕素内服溶液在5倍推荐剂量(100 mg·d-1)范围内对母猪的血液生理生化功能和主要脏器未造成明显的不良影响。结果表明,国产烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情,一次量20 mg,连续给药18 d,临床应用安全、有效。 相似文献
8.
9.
A novel exopolysaccharide from marine-derived red yeast Rhodotorula mucilaginosa strain YL-1 was produced and characterized. The highest yield of polysaccharide reached 15.1 g/L after medium and culture parameter optimization. This exopolysaccharide, composed of four neural monosaccharides including glucose, mannose, galactose and fucose, had an average molecular weight of 1200 KDa. It had good immunomodulatory activity on RAW256.7 cell lines. ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) and Q-PCR (quantitative real-time PCR) results showed that the cell was stimulated to express more IL-6, IL-18, IL-1β and TNFα cytokines than the control group. This is the first report of an exopolysaccharide with immunomodulatory activity from marine-derived Rhodotorula mucilaginosa. 相似文献
10.
Based on the perspective of ecological concept,this study first interpreted the background of ecological civilization construction,and combed the relationship between ecological concept and small town planning.Second,it expounded the ecological problems of natural resources,economic development,landscape system,social humanities and other aspects in the construction of contemporary small towns.According to the study,the construction of small towns based on the ecological concept should establish the concept of "ecology first",practice "multiple compliance",coordinate the relationship with other planning,make reasonable planning and design in the aspects of town scale,functional orientation,structural form,road traffic,landscape style and features,humanistic characteristics,and strengthen the implementation,supervision and management of planning.Finally,summary and outlook was made,hoping that the study will be of reference value and guidance to the planning and construction of small towns. 相似文献